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你好，歡迎來到上海華雅思創(chuàng)生物科技有限公司官網！
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| 產地 | 中國 |
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| 品牌 | 華雅干細胞 |
| 貨號 | E8725F |
| 用途 | MSC細胞培養(yǎng) |
| 組織來源 | |
| 細胞形態(tài) | |
| 是否是腫瘤細胞 | |
| CAS編號 | |
| 保質期 | |
| 器官來源 | |
| 免疫類型 | |
| 品系 | |
| 生長狀態(tài) | |
| 物種來源 | |
| 包裝規(guī)格 | 450+50mL/套 |
| 純度 | % |
| 是否進口 | 否 |
產品組份：本產品包括以下8種明確公開組份：
DMEM/F12 base Essential GFs
Glutamine Transferrin
NaHCO3 Albumin
Selenium Insulin
脂肪間充質干細胞的分離：
1. 人脂肪組織來自脂肪抽吸患者的廢棄脂肪組織。
2. 無菌PBS反復漂洗除菌。
3. 將脂肪組織轉移至50mL或250mL離心管，加入等體積的使用alpha-MEM配制的膠原酶溶液，使其終濃度達到0.1%（重量/體積）。
4. 37℃，搖床（120rpm）消化2小時以上。
5. 室溫靜置10分鐘，吸除上層油滴。
6. 離心，800g，10分鐘，收集消化細胞。
7. PBS洗滌一次，500g，10分鐘。MSCs無血清完全培養(yǎng)基懸浮細胞。
8. 計細胞數(shù)，調整細胞濃度，按照5～10×105/cm2底面積接種。
9. 次日觀察，如無污染，繼續(xù)培養(yǎng)至培養(yǎng)基顏色變黃，或貼壁細胞密度達到30%以上。補充新鮮的MSC無血清完全培養(yǎng)基。
10. 細胞密度達到80%左右時，按照以下步驟傳代培養(yǎng)。
間充質干細胞的傳代：
1. 吸去培養(yǎng)液。
2. 用1×PBS洗滌細胞2次，以去除殘留的培養(yǎng)液。
3. 加入PBS，之后加入0.25％Trypsin-0.1%EDTA，PBS與胰蛋白酶體積比為4:1，兩者總量以覆蓋培養(yǎng)皿或培養(yǎng)瓶表面為宜。輕輕旋轉，置37℃培養(yǎng)箱中消化3～5分鐘。用手輕拍培養(yǎng)器皿的壁，顯微鏡下可見絕大部分細胞變圓，極少量細胞貼壁仍呈紡錘形，極少量細胞已經懸浮即可終止消化。依據(jù)不同批次胰蛋白酶活性不同，消化的時間以顯微鏡下觀察細胞變圓為準，但是，推薦消化時間不低于3分鐘。
4. 立即加入等體積的間充質干細胞完全培養(yǎng)液，用吸管吸取液體，反復吹打培養(yǎng)器皿底壁，使細胞 脫離瓶皿底壁。
5. 離心（250g，5分鐘），吸去上清液。
6. 用2～3mL間充質干細胞的完全培養(yǎng)液重懸細胞。
7. 按照6000個細胞/cm2的密度來接種細胞。
8. 加足夠的間充質干細胞的完全培養(yǎng)液，在37℃，5％ CO2和 相對濕度的培養(yǎng)箱中培養(yǎng)。
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