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| 產(chǎn)地 | 國內(nèi) |
| 品牌 | Beyotime |
| 貨號 | P0013B |
| 用途 | 組織裂解 |
| 包裝規(guī)格 | 100ml |
| 純度 | % |
| CAS編號 | |
| 別名 | 裂解液 |
| 是否進口 | 否 |
產(chǎn)品名稱:Beyotime P0013B RIPA Lysis Buffer 裂解液
產(chǎn)品貨號:P0013B
產(chǎn)品品牌:Beyotime
產(chǎn)品產(chǎn)地:國內(nèi)
產(chǎn)品規(guī)格:100ml
用途范圍:組織裂解
英文名稱:RIPA Lysis Buffer
產(chǎn)品介紹:
碧云天生產(chǎn)的RIPA裂解液(RIPA Lysis Buffer)是一種傳統(tǒng)的細胞組織快速裂解液。RIPA裂解液裂解得到的蛋白樣品可以用于常規(guī)的PAGE、Western、免疫沉淀(immunol precipitation,IP)、免疫共沉淀(co-IP)和ELISA等。
本產(chǎn)品可以用于動物、植物的細胞或組織樣品,也可以用于真菌或細菌樣品。RIPA裂解液的配方有很多種,根據(jù)其裂解液的強度大致可以分為強、中、弱三類。
RIPA裂解液(強)的主要成分為50mM Tris(pH 7.4),150mM NaCl,1% Triton X-100,1% ,0.1% SDS,以及orthovanadate,EDTA,leupeptin等多種抑制劑。可以有效抑制蛋白降解。
產(chǎn)品應用:
本產(chǎn)品可以用于動物、植物的細胞或組織樣品,也可以用于真菌或細菌樣品的組織裂解。
產(chǎn)品使用說明:
a.把組織切成細小的碎片。
b.融解RIPA裂解液,混勻。取適當量的裂解液,在使用前數(shù)分鐘內(nèi)加入PMSF,使PMSF的最終濃度為1mM,或者根據(jù)實驗需要加入適當?shù)纳鲜鰀an bai mei磷酸酶抑制劑混合物。
c.按照每20毫克組織加入150-250微升裂解液的比例加入裂解液。(如果裂解不充分可以適當添加更多的裂解液,如果需要高濃度的蛋白樣品,可以適當減少裂解液的用量。)
d.用玻璃勻漿器勻漿,或使用碧云天生產(chǎn)的E6600 TissueMaster™手持式組織研磨儀研磨,直至充分裂解。也可以把組織樣品冷凍后液氮研磨,研磨充分后加入裂解液進行裂解。
e.充分裂解后,10000-14000g離心3-5分鐘,取上清,即可進行后續(xù)的PAGE、Western和免疫沉淀等操作。每20mg凍存的小鼠肝臟組織用200微升本裂解液裂解后獲得的上清,其蛋白濃度約為15-25mg/ml,不同狀態(tài)的不同組織有所不同。
f.如果組織樣品本身非常細小,可以適當剪切后直接加入裂解液裂解,通過強烈vortex使樣品裂解充分。然后同樣離心取上清,用于后續(xù)實驗。直接裂解的優(yōu)點是比較方便,不必使用勻漿器或研磨設(shè)備,缺點是不如勻漿或研磨那樣裂解得比較充分。
注:RIPA裂解液的裂解產(chǎn)物中經(jīng)常會出現(xiàn)一小團透明膠狀物,屬正常現(xiàn)象。該透明膠狀物為含有基因組DNA等的復合物。在不檢測和基因組DNA結(jié)合特別緊密的蛋白的情況下,可以直接離心取上清用于后續(xù)實驗;如果需要檢測和基因組結(jié)合特別緊密的蛋白,則可以通過超聲處理打碎打散該透明膠狀物,隨后離心取上清用于后續(xù)實驗。如果檢測一些常見的轉(zhuǎn)錄因子,例如NF-kappaB、p53等時,通常不必進行超聲處理,就可以檢測到這些轉(zhuǎn)錄因子。
產(chǎn)品特點:
1.特殊的抗氧化劑有效地抑制樣品在檢測過程中產(chǎn)生新的MDA,使檢測更加準確。同時本檢測試劑盒在檢測過程中可以把部分MDA天然形成的聚丙二醛分解成MDA,使對脂質(zhì)氧化的測定更加準確。
2.本試劑盒可以檢測低達1μM的MDA,也可檢測高達200μM的MDA在本試劑盒的檢測范圍內(nèi),可以直接用本試劑盒檢測血漿、血清、尿液樣品等。
保存條件:
-20℃保存,一年有效。
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